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<font size="6">PCR檢測植物病毒感染</font> <s4e> pid=194 show=原始設計者;簡介 </s4e> <div style="float:left;"> <font color="red" size="5">觀察植物在特定病毒感染後病徵,並利用PCR技術檢測植物是否有被病毒感染。 <br></font><br> <br><br> </div> <div style="float: right; border:black 1px solid;"> <font color="blue">實驗材料: </font> :*葉片 數片 :*1.5 ml 離心管 3/個 :*廢液杯 1/個 :*離心機 1/個 :*tip 1/個 :*Rank 1/個 :*電子秤 1/個 :*打洞器 1/個 :*微量離心管 1/個 :*Master mix(Taq, buffer, dNTP, dye) 10/µL :*TE buffer 100/ml :*Primer F’ 4/µL :*Primer R’ 4/µL :*ddH2O 1/µL :*PCR machine 1/台 :*電泳槽 1/台 </div> ==1.現象說明: == 1.Potato virus 馬鈴薯微嵌紋病毒 <br> <img src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/b/b4/Potato_virus.png' width='600px' height='200'> <br> 病毒顆粒為絲狀彎曲 ( Transmission electron micrographs)。PVX 感染茄科植物其病徵表現主要為系統性,感染藜科(Chenopodiaceae)或莧科(Amaranthaceae)後會造成局部性病斑(local lesions),也會感染部分豆科植物(Leguminosae)。 <br> 病徵: <br> *1.1潛伏感染,並無明顯症狀 <br> *1.2輕微:斑駁 <br> *1.3嚴重: **皺葉嵌紋 **植株矮化 **新生葉片小化 **植株頂端、塊莖大量壞疽,植株死亡 <table border="1"> </table> <br> 2.Tobacco mosaic virus 煙草嵌紋病毒 <br> <br> 人類第一個成功分離出的病毒 以通過濾過器,故又稱「濾過性病毒」,引起的病害稱「病毒病」、「毒素 病」,為介於生物與非生物之間的病原體。 <br> 病徵: <br> *葉部呈現不規則之暗綠色與淡綠嵌紋,嵌紋邊緣多為波浪狀 <br> *葉片細胞壞疽 <br> *葉片向下捲曲 **在菸草(Nt)過敏反應(NN vs nn) ==2.探究問題:(此為引導,學習者必須要提出合理的假說) == *2.1 光線是如何影響種子的發芽? *2.2 好光性植物種子除了苜蓿芽還有哪些植物?有哪些是厭光性種子? *2.3 有沒有哪一組的操作能夠證明光敏素(Pr、Pfr)具有可逆性?請說明 <br><br> ==3.實作項目 == *1.準備4個培養皿,墊好厚紙巾,各裝入20粒苜蓿芽種子 <br> <img style="width:300px;" src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/d/d6/Sample_seeds.png'/> <br> *2.將培養皿標記上組別及光處理 <br> *3.到隔壁暗室,加水到培養皿內(厚紙巾稍微濕潤),等候10分鐘,再進行光處理 <br> <img style="width:400px;" src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/64/Pr_Pfr_form.jpg'/> <br> *4.放回鋁箔裡,培養2天後進行萌發種子觀察 <br><br> ==4.分析與結論 == *4.1 由各組在不同光條件下種子萌芽的反應,可推得Pr、Pfr與種子萌發的關係 *4.2 照射紅光Pfr轉換成Pr,Pr促進好光性種子萌發,則發芽率較高。 *4.3 在組別4中,照射紅光再照射遠紅光,Pfr抑制好光性種子萌發,發芽率較低,證明Pr、Pfr之間可互相轉換。 <br><br> ==5.教學目標與評量 == *5.1 了解光敏素的類別及影響種子萌芽的機制 *5.2 透過不同光條件下的實驗結果,可得知光敏素與種子萌發的關係。 *5.3 學習準備工作與實驗的操作方式。 <br><br> ==6.參考資料: == <br><br><br> ==7.參考說明: == <br>
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