"不同波長影響光合作用速率" 修訂間的差異

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植物行光合作用以製造養分,光合作用速率因光合色素對各色光有著不同的吸收程度而有影響。
 
植物行光合作用以製造養分,光合作用速率因光合色素對各色光有著不同的吸收程度而有影響。
  
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==2.探究問題:(此為引導,學習者必須要提出合理的假說) ==
 
==2.探究問題:(此為引導,學習者必須要提出合理的假說) ==
  
*2.1 觀察「萃取DNA膠圖」後標示組別與樣本種類,並寫出從膠圖中看到什麼結果?
+
*2.1 為什麼要使用小蘇打水?
*2.2 標示NanoDrop測量結果,並分析你所抽取的DNA品質如何。
+
*2.2 為什麼葉子經光照射後會浮起?
*2.3 觀察「PCR膠圖」後標示組別,並寫出從膠圖中看到什麼結果?
+
*2.3 為什麼不同色光照射下葉子浮起所花時間不同?
*2.4 查查看,池上米?越光米?台秈OO號?台農OO號?桃園OO號?壽司米?台灣米的名字種類很多,為什麼這樣命名?是依據什麼做的分類?
 
*2.5 想想看,若將延長(extension)的溫度下調至36℃,會不會影響實驗結果?為什麼?
 
  
  
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==3.實作項目 ==
 
==3.實作項目 ==
  
*1.萃取DNA
+
*1.地瓜葉打洞,取得圓形小葉子(18片/組)
:*1. 取10粒米切取胚芽部分放入研缽。
+
*2.將葉子放入針筒,裝上活塞並吸取4ml 指定溶液
加BashingBead buffer 750 ul研磨。(打破細胞)
+
*3.拉開活塞,排出葉片內的空氣(可觀察到葉片沉降)
:*2. 移入BashingBead tube。
+
*4.取6片葉子,放入指定溶液,並置於燈源下
加Proteinase K 1 ul。(分解蛋白質)<br>
+
*5.杯中液面高度約5cm指定溶液(小蘇打水)
65 ℃ 水浴 10 min。<br>
+
*6.記錄前3片葉子浮至頂端的總時間
10,000 rpm 離心 1 min。(移除雜質)
 
:*3. 取上清液500 ul加入III-F filter+ collection tube。<br>
 
8,000 rpm 離心 1 min。(過濾雜質)
 
:*4. 移除III-F filter。
 
:*5. 在collection tube中,加入Lysis buffer 1500 ul。(打開DNA+準備Binding)<br>
 
和過濾液充分混合。
 
:*6. 取混合液 800 ul。(DNA Binding在膜上)<br>
 
加入II-C column+ collection tube。<br>
 
10,000 rpm 離心 1 min。
 
:*7. 倒掉濾液。<br>
 
重複step 6兩次。
 
:*8. 把II-C column移至新的collection tube。<br>
 
加入Pre-wash buffer 200 ul。(去除糖類、蛋白質)<br>
 
10,000 rpm 離心 1 min。
 
:*9. 倒掉濾液。<br>
 
加入Wash buffer 500 ul。(去除糖類、蛋白質)<br>
 
10,000 rpm 離心 1 min。
 
:*10. 把II-C column移至新的eppendorf。
 
加入Elution buffer 20 ul。(回溶DNA)<br>
 
10,000 rpm 離心 30 sec。
 
:*11. 取HRC-filter+ collection tube。<br>
 
加入Prep solution 600 ul。<br>
 
8,000 rpm 離心 3 min。
 
:*12. 把HRC-filter移至新的eppendorf。(去除酚類)<br>
 
加入剛剛Elute的DNA 20 ul。<br>
 
15,000 rpm 離心 3 min。
 
:*13. 標上組別, -20 ℃保存。
 
 
 
:*14. 測DNA濃度(NanoDrop)
 
 
 
:*15. 跑2%電泳
 
 
 
 
 
*跑PCR
 
:*1. PCR 試劑配置-四要素<br>
 
<img style="width:500px;" src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/f/f1/PCR%E8%A9%A6%E5%8A%91.png/800px-PCR%E8%A9%A6%E5%8A%91.png'/>
 
<br>Taq polymerase最適合的extension溫度是72℃
 
 
 
*2. PCR 試劑配置<br>
 
<img style="width:500px;" src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/c/ca/Pcr%E8%A9%A6%E5%8A%91%E9%85%8D%E7%BD%AE.png/800px-Pcr%E8%A9%A6%E5%8A%91%E9%85%8D%E7%BD%AE.png'/>
 
 
 
*3. PCR 條件
 
<br>
 
<img style="width:500px;" src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/c/cd/Pcr%E6%A2%9D%E4%BB%B6.png/800px-Pcr%E6%A2%9D%E4%BB%B6.png'/>
 
 
 
<br>
 
<img style="width:500px;" src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/PCR%E6%BA%AB%E5%BA%A6.png'/>
 
 
 
*4. 電泳跑膠
 
<br>
 
<img style="width:500px;" src='https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/a/aa/%E9%9B%BB%E6%B3%B3%E8%86%A0.png/800px-%E9%9B%BB%E6%B3%B3%E8%86%A0.png'/>
 
 
 
 
 
 
 
  
  

於 2020年8月5日 (三) 02:25 的修訂

不同波長影響光合作用速率

原始設計者:彰師大

觀察植物葉片在不同光源下的的光合作用效率,了解光的波長對光合速率的影響。



實驗材料:

  • 植物葉片 數片
  • 打洞器(吸管) 數支
  • 0.2% 小蘇打水 100 mL
  • 100c.c 塑膠杯 3個/組
  • 10ml 注射筒 1個/組
  • 燈泡(白、藍、紅光) 1套/組




1.現象說明:

植物行光合作用以製造養分,光合作用速率因光合色素對各色光有著不同的吸收程度而有影響。






2.探究問題:(此為引導,學習者必須要提出合理的假說)

  • 2.1 為什麼要使用小蘇打水?
  • 2.2 為什麼葉子經光照射後會浮起?
  • 2.3 為什麼不同色光照射下葉子浮起所花時間不同?




3.實作項目

  • 1.地瓜葉打洞,取得圓形小葉子(18片/組)
  • 2.將葉子放入針筒,裝上活塞並吸取4ml 指定溶液
  • 3.拉開活塞,排出葉片內的空氣(可觀察到葉片沉降)
  • 4.取6片葉子,放入指定溶液,並置於燈源下
  • 5.杯中液面高度約5cm指定溶液(小蘇打水)
  • 6.記錄前3片葉子浮至頂端的總時間




4.分析與結論

  • 4.1 從萃取DNA膠圖中判斷是否有抽出DNA。
  • 4.2 從PCR膠圖中判斷樣本是BAD2基因是否正常,並判斷是否與預期結果相同。
  • 4.3 若PCR膠圖有585bp和355bp兩條bands,則代表此為純品系一般米DNA;若膠圖中有577bp和257bp兩條bands,則為純品系香米DNA;若同時具有585bp、355bp和257bp,則為異型合子的一般米。





5.教學目標與評量

  • 5.1 了解香米具有香氣的原因是由於BAD2的缺損。
  • 5.2 能熟悉DNA萃取的操作方式。
  • 5.3 能從Nano drop的結果判斷DNA品質好壞。
  • 5.4 熟悉PCR和電泳的操作方式。
  • 5.5 能從PCR膠圖判斷樣品的種類。





6.參考資料:





7.參考說明:


  • 萃取DNA膠圖

  • PCR膠圖