不同波長影響光合作用速率

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不同波長影響光合作用速率

原始設計者:彰師大

觀察植物葉片在不同光源下的的光合作用效率,了解光的波長對光合速率的影響。



實驗材料:

  • 植物葉片 數片
  • 打洞器(吸管) 數支
  • 0.2% 小蘇打水 100 mL
  • 100c.c 塑膠杯 3個/組
  • 10ml 注射筒 1個/組
  • 燈泡(白、藍、紅光) 1套/組




1.現象說明:

植物行光合作用以製造養分,光合作用速率因光合色素對各色光有著不同的吸收程度而有影響。

</table>



2.探究問題:(此為引導,學習者必須要提出合理的假說)

  • 2.1 觀察「萃取DNA膠圖」後標示組別與樣本種類,並寫出從膠圖中看到什麼結果?
  • 2.2 標示NanoDrop測量結果,並分析你所抽取的DNA品質如何。
  • 2.3 觀察「PCR膠圖」後標示組別,並寫出從膠圖中看到什麼結果?
  • 2.4 查查看,池上米?越光米?台秈OO號?台農OO號?桃園OO號?壽司米?台灣米的名字種類很多,為什麼這樣命名?是依據什麼做的分類?
  • 2.5 想想看,若將延長(extension)的溫度下調至36℃,會不會影響實驗結果?為什麼?




3.實作項目

  • 1.萃取DNA
  • 1. 取10粒米切取胚芽部分放入研缽。

加BashingBead buffer 750 ul研磨。(打破細胞)

  • 2. 移入BashingBead tube。

加Proteinase K 1 ul。(分解蛋白質)
65 ℃ 水浴 10 min。
10,000 rpm 離心 1 min。(移除雜質)

  • 3. 取上清液500 ul加入III-F filter+ collection tube。

8,000 rpm 離心 1 min。(過濾雜質)

  • 4. 移除III-F filter。
  • 5. 在collection tube中,加入Lysis buffer 1500 ul。(打開DNA+準備Binding)

和過濾液充分混合。

  • 6. 取混合液 800 ul。(DNA Binding在膜上)

加入II-C column+ collection tube。
10,000 rpm 離心 1 min。

  • 7. 倒掉濾液。

重複step 6兩次。

  • 8. 把II-C column移至新的collection tube。

加入Pre-wash buffer 200 ul。(去除糖類、蛋白質)
10,000 rpm 離心 1 min。

  • 9. 倒掉濾液。

加入Wash buffer 500 ul。(去除糖類、蛋白質)
10,000 rpm 離心 1 min。

  • 10. 把II-C column移至新的eppendorf。

加入Elution buffer 20 ul。(回溶DNA)
10,000 rpm 離心 30 sec。

  • 11. 取HRC-filter+ collection tube。

加入Prep solution 600 ul。
8,000 rpm 離心 3 min。

  • 12. 把HRC-filter移至新的eppendorf。(去除酚類)

加入剛剛Elute的DNA 20 ul。
15,000 rpm 離心 3 min。

  • 13. 標上組別, -20 ℃保存。
  • 14. 測DNA濃度(NanoDrop)
  • 15. 跑2%電泳


  • 跑PCR
  • 1. PCR 試劑配置-四要素


Taq polymerase最適合的extension溫度是72℃

  • 2. PCR 試劑配置

  • 3. PCR 條件



  • 4. 電泳跑膠







4.分析與結論

  • 4.1 從萃取DNA膠圖中判斷是否有抽出DNA。
  • 4.2 從PCR膠圖中判斷樣本是BAD2基因是否正常,並判斷是否與預期結果相同。
  • 4.3 若PCR膠圖有585bp和355bp兩條bands,則代表此為純品系一般米DNA;若膠圖中有577bp和257bp兩條bands,則為純品系香米DNA;若同時具有585bp、355bp和257bp,則為異型合子的一般米。





5.教學目標與評量

  • 5.1 了解香米具有香氣的原因是由於BAD2的缺損。
  • 5.2 能熟悉DNA萃取的操作方式。
  • 5.3 能從Nano drop的結果判斷DNA品質好壞。
  • 5.4 熟悉PCR和電泳的操作方式。
  • 5.5 能從PCR膠圖判斷樣品的種類。





6.參考資料:





7.參考說明:


  • 萃取DNA膠圖

  • PCR膠圖